細胞培養(yǎng)室的設置、設備和準備工作一、細胞培養(yǎng)實驗室的設置及設備(一)細胞培養(yǎng)實驗室的設置組織細胞培養(yǎng)技術與其他一般實驗室工作的主要區(qū)別在于要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。目前,超凈工作臺的廣泛使用,很大程度上方便了組織細胞培養(yǎng)工作,并使一些常規(guī)實驗室有可能用于進行細胞培養(yǎng)。細胞培養(yǎng)實驗室應能進行六方面的工作:無菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲藏。
.無菌操作區(qū)
()無菌操作室:無菌操作區(qū)只限于細胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域,最好能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。理想的無菌操作室應劃為三部分:
a) 更衣室—―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 緩沖間—―位于更衣間與操作間之間,目的是為了保證操作間的無菌環(huán)境,同時可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。
c) 無菌操作間—―專用于無菌操作、細胞培養(yǎng)。其大小要適當,且其頂部不宜過高(不超過.m)以保證紫外線的有效滅菌效果;墻壁光滑無死角以便清潔和消毒。工作臺安置不應靠墻壁,臺面要光滑壓塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。無菌操作間的空氣消毒:紫外線燈—-產生臭氧,并且室內溫度及濕度均較高,不利于工作人員健康??諝膺^濾的恒溫恒濕裝置—-最好。表潔凈室(區(qū))空氣潔凈度級別表潔凈度級別 塵粒最大允許數(shù)/立方米 微生物最大允許數(shù) 浮游菌/立方米 沉降菌/皿
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級 ,, , - 無臭氧紫外線消毒器電子消毒滅菌器—-在高壓電場作用下,電子管的內外電極發(fā)生強烈電子轟擊,使空氣電離而將空氣中的氧轉換成臭氧。臭氧是一種強氧化劑,能同細菌的胞膜及酶蛋白氫硫基進行氧化分解反應,從而靠臭氧氣體彌漫性擴散達到殺菌之目的,消毒時沒有死角。消毒后空間的殘留臭氧只需~min即能自行還原成氧氣,空氣不留異味,消毒物體表面不留殘毒。()凈化工作臺:操作簡單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺主要有兩種:a)側流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。凈化工作臺工作原理(大致相同)—-通常是將室內空氣經粗過濾器初濾,由離心風機壓入靜壓箱,再經高效空氣過濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū),從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。